რა ვექტორები უნდა გააკეთონ გენებსა და კლონირებაზე
მოლეკულურ კლონირებაში ვექტორი არის დნმ-ის მოლეკულა, რომელიც წარმოადგენს უცხოელი გენი (ებ) ის სხვა საკანში გადასვლის ან ჩასმის გადამყვანს, სადაც შეიძლება გაიმეორონ ან / და გამოხატული. ვექტორებს შორისაა გენი კლონირებისთვის აუცილებელი იარაღები და ძალიან სასარგებლოა, თუ ისინი ასევე შეიტანენ რაიმე სახის მარკერის გენის კოდირებას ბიოინდკატორის მოლეკულას, რომელიც შეიძლება შეფასდეს ბიოლოგიურ შეფასებაში, რათა უზრუნველყოს მათი ჩასმა და გამოხატვა მასპინძელ ორგანიზმში.
კერძოდ, კლონირებადი ვექტორი არის დნმ-ისგან, რომელიც იკვრება ვირუსის, პლაზმური ან უჯრედების (მაღალი ორგანიზმებისგან) კლონირების მიზნით უცხო დნმ ფრაგმენტთან. მას შემდეგ, რაც კლონირება ვექტორი შეიძლება იყოს სტაბილურად შენარჩუნებული ორგანიზმში, ვექტორი ასევე შეიცავს თვისებებს, რომლებიც საშუალებას მისცემს მოხერხებულ ჩხირვას ან დნმ-ის მოხსნას. კლონირების ვექტორის კლონირების შემდეგ დნმ-ის ფრაგმენტი შეიძლება კიდევ უფრო ვიწრო იყოს სხვა ვექტორში, რომელიც შეიძლება უფრო სპეციფიურობით გამოვიყენოთ.
ზოგიერთ შემთხვევაში ვირუსები გამოიყენება ბაქტერიის ინფექციისთვის. ეს ვირუსები უწოდებენ ბაქტერიოფაფს, ან ფაზას, მოკლედ. Retroviruses შესანიშნავი ვექტორები არიან გენების შემოღება ცხოველების უჯრედებში. დნმ-ის მრგვალი ნაწილაკები არიან ყველაზე გავრცელებული ვექტორები, რომლებიც იყენებენ უცხო დნმ-ს ბაქტერიულ უჯრედებში. ისინი ხშირად ატარებენ ანტიბიოტიკულ რეზისტენტობას, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას პლაზმური დნმ-ის გამოხატვის შესამოწმებლად ანტიბიოტიკულ პეტრეზე.
მცენარეთა უჯრედებში გადაცემული გენების ტრანსპორტირება საყოველთაოდ შესრულებულია ნიადაგის ბაქტერიული აგრობაქტეროუმის ტუმაფაციანით , რომელიც მოქმედებს ვექტორის სახით და მასპინძელი უჯრედის დიდ პლაზმურად ათავსებს. კლონირების ვექტორის შემცველი საკნები მხოლოდ მაშინ გაიზრდება ანტიბიოტიკები.
ძირითადი ტიპების კლონირება
ექვს ძირითადი ტიპის ვექტორები:
- Plasmid. ცირკულარული უჯრედოვანი დნმ-ის ავტომატური ბაქტერიული უჯრედის შიგნით. Plasmids- ს აქვს მაღალი ასლის ნომერი, როგორიცაა PUC19, რომელსაც აქვს 500-700 ეგზემპლარის ასლი ნომერი თითო საკანში.
- ფგეა. ხაზოვანი დნმ-ის მოლეკულები, რომლებიც მიიღება ბაქტერიოფაგის ლამბდას. შეიძლება შეიცვალოს უცხო დნმ-ის სიცოცხლის ციკლის გარეშე.
- Cosmids. სხვა ცირკულარული ექსტრაქტოზომული დნმ-ის მოლეკულა, რომელიც აერთიანებს პლაზმის და ფაზის თვისებებს.
- ბაქტერიული ხელოვნური ქრომოსომები. ბაქტერიული მინი-პლაზმის პლაზმის საფუძველზე.
- საფუარი ხელოვნური ქრომოსომები. ეს არის ხელოვნური ქრომოსომა, რომელიც შეიცავს ტელმეირებს (უჯრედების განყოფილების ბოლოდან ერთჯერადი ქრომოსომების დროს ერთჯერადი ბუფერი), რეპლიკაციის წარმომავლობის, საფუარისა (ქრომოსომა, რომელიც აკავშირებს დის ქრომატიდებს ან დიაიდს), და აირჩიეთ მარკერი იდენტიფიკაციისთვის საფუარი უჯრედებში.
ადამიანის ხელოვნური ქრომოსომა. ამ ტიპის ვექტორია პოტენციურად სასარგებლოა ადამიანთა უჯრედებში გენური მიწოდებასა და გამოხატვის შესწავლის ინსტრუმენტი და ადამიანის ქრომოსომა ფუნქციის განსაზღვრა. მას შეუძლია განახორციელოს ძალიან დიდი დნმ-ის ფრაგმენტი.
ყველა ტექნოლოგიურ ვექტორს აქვს რეპლიკაციის წარმოშობა (რეპლიკატორი), კლონირებადი საიტი (სადაც დნმ-ს უცხოური დნმ-ის ჩადგება ვერ ხერხდება არსებითი მარკერების რეპლიკაცია ან ინაქტივაცია) და შერჩევითი მარკერი (როგორც წესი, გენური, რომელიც უზრუნველყოფს ანტიბიოტიკას წინააღმდეგობას).