ლიოფილიზაცია, ან გაყინვის გაყინვა, მოკლე ლაბორატორიული პროცედურაა
ლიოფილაციის საფუძვლები
ბაქტერიული, სოკოვანი, საფუარი ან სხვა მიკროორგანიზმის კულტურის შესანახად ერთ-ერთი საუკეთესო საშუალებაა გაყინვის პროცესის გამოყენება. ეს მოკლე ლაბორატორიული პროცედურა შეიძლება განხორციელდეს ნებისმიერი კომერციულად ხელმისაწვდომი ყინვისგან, რომელიც შეინარჩუნებს თქვენს კულტურას. იმის გამო, რომ ლიოფილიზაცია არის ყველაზე რთული და ძვირადღირებული ფორმა საშრობი, პროცესი ჩვეულებრივ ზღუდავს მაღალი ღირებულების დელიკატურ, სითბოს მგრძნობიარე მასალებს. ნივთიერებები, რომლებიც არ არის დაზიანებული გაყინვა, შეიძლება, როგორც წესი, იყოს lyophilized ისე, რომ მაცივრიანი შენახვის არასაჭირო.
ეს პროცესი შეიძლება მოკლედ იყოს სამი საათის განმავლობაში და 24 საათის განმავლობაში, არა კულტურის ზრდის დროსაც.
ლიოფილაციის ეტაპობრივი პროცესი
პირველ რიგში, იზრდება ღამე კულტურის ან გაზონის, მიკროორგანიზმზე ლ.ბ.-ში ან სხვა სათანადო ნუტრიენტური აგარის ფირფიტაზე.
შემდეგი, მომზადება სტერილური crimp-cap ფლაკონების მიერ autoclaving ვადამდე ერთად caps (რეზინის stoppers) განთავსებული თავისუფლად თავზე. ადგილი ქაღალდის ეტიკეტები დაბეჭდილი კულტურის იდენტიფიკაციის შიგნით მილები ადრე autoclaving. ალტერნატიულად, გამოიყენეთ მილები, რომლებიც განკუთვნილია ქოქოსისთვის .
4 მლ ლიფილილიზაციის ბუფერის დამატება ფირფიტაზე. საჭიროების შემთხვევაში, უჯრედები შეიძლება შეჩერდეს სტერილური მინის როდებით.
სწრაფად გადაეცემა კულტურის შეჩერება სტერილიზებული ფლაკონებისთვის. დამატება დაახლოებით 1.5 მლ თითო ფლაკონში. ბეჭედი რეზინის ქუდით.
გაყინვას კულტურის შეჩერება ფლაკონში შიგნით - 20 გრადუსიანი ცილის საყინარში.
მას შემდეგ, რაც კულტურები გაყინულია, გაყინვის საყინულე მზადდება დროულად და საშუალებას აძლევს დროს შესაბამისი ტემპერატურისა და ვაკუუმური პირობების სტაბილიზაციაში. ამის გაკეთება მწარმოებლის ინსტრუქციების შესაბამისად, კონკრეტული ბრენდის გაყინვის საწმენდი ბრენდისთვის.
ფრთხილად და ადექტურად, მიიტანეთ ფლაკონის საფარში ფლაკონის ზედა ნაწილში, ისე, რომ ტენიანობა შეიძლება გაყინვას გაყინვის პროცესში გაჩერდეს და ფლაკონების გაყინვის პალატაში ჩაყაროს. მიუთითეთ ვაკუუმი პალატის ინსტრუქციის შესაბამისად.
ნება კულტურის დრო სრულიად lyophilize (მშრალი out). ეს შეიძლება რამდენიმე საათიდან ღამის საათამდე, თითოეული ნიმუშის მოცულობის მიხედვით და რამდენი ნიმუში გაქვთ.
ამოღება ნიმუშები საწყისი ყინვები-საშრობი პალატის მწარმოებლის ინსტრუქციის მიხედვით და დაუყოვნებლივ დალუქეთ ფლაკონები რეზინის ქუდებით, შემდეგ კი ჩიპი.
შეინახეთ ლიფილილიზებული კულტურის კოლექცია ოთახის ტემპერატურაზე.
პროდუქტები დაგჭირდებათ
- გაყინვის საყინულე
- Nutrient ან სხვა შესაბამისი აგარის ფირფიტები (და ინკუბატორი იზრდება კულტურის)
- შუშის კვერთხი
- ლიოფილიზაციის ბუფერი
- კრიპ-ზედა ფლაკონები რეზინის საცავებით (და კერპი გამოიყენება კაფსებისათვის)
- საყინულე
მითითება:
SP სამეცნიერო. გაყინვის გაყინვის ძირითადი პრინციპები. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/